产品货号:
SY0590
中文名称:
内质网绿色荧光探针(活细胞)
英文名称:
ER-Tracker Green(BODIPY FL Glibenclamide),for live-cell imaging
产品规格:
20μl(1mM)
发货周期:
1~3天
产品价格:
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ER-Tracker Green由绿色荧光染料BODIPY FL和Glibenclamide偶联而成,其Ex= 504nm,Em= 511nm。格列本脲(Glibenclamide,glyburide),一种常用降血糖药物,在胰岛β细胞、胰岛素的分泌、心肌衰竭细胞功能以及心律不齐的研究等方面具有重要科研用途。格列本脲高度结合ATP-敏感型K+通道的磺脲受体,且本受体富集存在内质网上,因此适合用作内质网荧光探针。本制品为溶于DMSO的1mM ER-Tracker Green (BODIPY FL Glibenclamide)储存液,推荐工作浓度为~1μM。
ER-Tracker探针是一系列具有细胞膜透过性,对活细胞内质网具有高度选择性的探针,不像传统的DiOC6(3),该系列探针几乎不对线粒体着色,且在较低浓度即可实现对内质网的染色,且对细胞几乎无毒性。使用以下提供的优化步骤对活细胞染色后用醛固定,可以部分保留活细胞的染色特征。
分子式 | C37H42BClF2N6O6S |
分子量 | 783.1 |
外观 | 液体 |
光谱特性 | Ex/Em=504nm/511nm |
滤片 | FITC |
结构式 |
组分 | 规格 |
ER-Tracker Green(BODIPY FL Glibenclamide,1mM) | 20μL |
说明书 | 1份 |
保存:-20℃,干燥避光,避免反复冻融,有效期半年。
- 避免反复冻融,可根据单次用量分装保存。避免将本品储存于无霜冰箱。
- DMSO有毒,请小心操作。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 本制品仅作科研用途!
本实验方案经牛肺动脉内皮细胞优化,且已被其他常规细胞系验证。但不同的细胞类型其最佳使用条件不同,还需用户根据该方案进行进一步优化。
- 试剂准备
使用前将ER-Tracker Green回温至室温,并简短离心使该DMSO溶液至管底。 - 细胞样品处理及染色
- 将1mM ER-Tracker Green储存液按照实验要求稀释至工作浓度,推荐工作浓度为~1μM。建议在不影响实验结果的前提下尽量使用较低浓度探针,以避免由于浓度过高染色导致的假象。
注:使用含Ca2+、Mg2+ Hank’s平衡盐溶液(HBSS/Ca/Mg)稀释该探针进行染色,可得到最佳实验结果。 - 染色
对于贴壁细胞,吸除培养皿中培养基,用HBSS清洗细胞,加入预热的染料工作液于37℃孵育细胞15~30min。吸除染色液,加入不含探针的新鲜培养液,并在荧光显微镜下观察细胞。
细胞如需固定,请参考以下步骤。
- 将1mM ER-Tracker Green储存液按照实验要求稀释至工作浓度,推荐工作浓度为~1μM。建议在不影响实验结果的前提下尽量使用较低浓度探针,以避免由于浓度过高染色导致的假象。
- 细胞固定
- 固定细胞:用4%甲醛于37℃固定细胞2min。
注:已染色细胞用醛固定后,仅部分ER-Tracker Green留在细胞内,荧光信号会有部分衰减。 - 清洗观察细胞:细胞固定后,可用合适缓冲液进行清洗,每次5min,共2次。清洗后可对细胞进行后续封片、镜检或进一步染色。
注:不建议对细胞进行透化处理,因为经Triton X-100透化后,无信号保留。
- 固定细胞:用4%甲醛于37℃固定细胞2min。
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